1、成果简介
研发有效的内毒素LPS脱毒方法具有重要意义,本项目一方面通过KDO定量方法检测对LPS分子的吸附能力,从发酵食品中筛选到LPS吸附能力最强酵母菌株CSW。证实LPS与Y. lipolytica细胞共存一段时间后,会产生LPS含量降低的现象。通过18s r DNA分析,菌株CSW1与1.0 mg/m L来源于E. coil O111:B4的LPS共存后,可使LPS水平降低约70%,而S. cerevisiae BY4742仅使 LPS含量近30%。
另外一方面,过敲除大肠杆菌E. coli染色体基因上与LPS合成相关基因,构建了多株能够直接合成新型特殊结构Kdo2-lipid A的突变菌株,具有低内毒素,适合用于大肠杆菌表达宿主生产各种蛋白及氨基酸。
2、关键技术
脂多糖LPS是存在于大多数革兰氏阴性菌外膜的主要组成部分,可通过激活宿主细胞内TLR4受体信号转导途径等,促进炎性细胞分泌多种细胞因子,进而引发强烈的免疫反应,造成疾病或者死亡,在食品和药品中是重要的毒力因子,因此研发有效的LPS脱毒方法具有重要意义。本成果获得了食品级的LPS脱毒菌株,具有应用前景。
工业发酵中大肠杆菌野生型菌株中内毒素释放,是导致热原污染的重要原因,这增加了分离纯化成本,本成果从源头改造获得低毒性的大肠杆菌平台菌株,避免了发酵工程中热原产生。
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